作者合成了一系列含有N-连接的类肽（Peptoid）结构的大环肽化合物，其中类肽基团的引入拓宽了侧链的多样性。同时，通过理论计算和实验测定相结合的方法，在兼顾其他理化性质的同时降低分子极性。该策略成功发现了具有高CXCR7结合亲和力（Ki < 100 nM）和被动渗透性（Papp > 5 × 10⁻⁶ cm/s）的环肽-类肽杂合分子。其中，生物活性肽25（Ki = 9 nM）在大鼠实验中实现了18%的口服生物利用度，体内体外数据相一致。

生 物 机 制

      趋化因子受体CXCR7是G蛋白偶联受体（GPCR）家族成员，能够以高亲和力结合配体CXCL11和CXCL12。其中，CXCL12（又称SDF-1）具有多种生理效应，包括刺激B淋巴细胞生成和骨髓髓系造血等。CXCR4作为首个被鉴定的与CXCL12结合的GPCR，因其在HIV复制周期中作为病毒进入T细胞的核心受体而备受关注。后续研究中又发现，CXCR4激活后可触发包括细胞外信号相关激酶和蛋白激酶B在内的信号通路，产生多效性生物学效应。

      与CXCR4不同，CXCR7在结合CXCL12后仅通过β-arrestin进行信号转导，不激活典型的G蛋白偶联通路。然而，CXCR7的分子药理学机制复杂，已知其可通过同源二聚化或与CXCR4形成异源二聚体，进而影响受体内化过程。另外研究还表明，CXCR7可作为CXCL12的清除受体，从而调节CXCR4趋化因子轴活性。

      CXCR7的表达受到严格调控，在癌症和炎症等病理过程中表达显著增强。研究表明，CXCR7在CXCL12/CXCR4介导的癌细胞跨内皮迁移过程中发挥关键作用。

      近期报道显示，通过调节CXCR7可改善动脉粥样硬化并促进血管重构，其机制与脂肪组织胆固醇摄取增加有关。此外，CXCR7还被证实可作为肾上腺髓质素（一种在心血管发育中起关键作用的肽类激素）的诱饵受体。一项II期临床试验评估了CXCL12基因疗法在心力衰竭患者中的安全性和有效性，这为口服生物可利用的CXCR7配体的递送提供了新的临床依据。其可调节CXCL12的水平，从而成为一种有吸引力的治疗靶点。

      已有文献和专利申请描述了针对CXCR7的小分子化合物的发现与开发。由于CXCR4和CXCR7共享相同的趋化因子配体CXCL12，且针对CXCR4的肽类衍生物已成功开发，因此可调节CXCR7活性的肽类化合物的识别也备受关注。

药 化 设 计

一）测试方法：

      亲和力测试：通过测定肽类化合物从CXCR7受体过表达的人细胞膜上取代放射性标记的¹²⁵I-CXCL12的能力，评估其对CXCR7的结合亲和力（以K_i值表示）

      激动活性测试：通过检测肽类化合物诱导CXCR7受体过表达人细胞中β-arrestin招募的能力，评估其对CXCR7的功能激动活性（以EC₅₀值表示）。

      被动细胞渗透性与EPSA‌：采用低外排型Madin-Darby犬肾（MDCKII-LE）细胞系测定肽类化合物膜被动扩散的速率。为优化被动渗透性，通过超临界流体色谱法（EPSA）测定肽类化合物的极性。

二）肽的优化

      文献报道的大环六肽1是一种低纳摩尔级功能活性的CXCR7调节剂。其在CXCR7 β-arrestin检测中的功能活性（EC₅₀ = 46 nM）可以确认，但结合亲和力相对较低（K_i = 2.1 μM）。另外，由于碱性精氨酸基团存在，该化合物在MDCKII-LE检测中表现出较差的渗透性（P_app < 1×10⁻⁶cm/s）。本研究以多肽1为起点，合成了新型大环肽-类肽杂合物，旨在获得更高亲和力、更低EPSA的化合物，以提高被动渗透性，推动口服生物可利用CXCR7调节剂的开发。

亲和力优化

渗透性优化

效力和渗透性的平衡

N-Me化 

体内评估

结论

      该研究中，作者成功地将低亲和力、高极性且无渗透性的肽优化为具有高CXCR7结合亲和力（Ki < 100 nM）和MDCKII-LE体外被动渗透性（Papp > 5 × 10⁻⁶ cm/s）的大环肽-类肽杂合分子，从而实现了高效且具有细胞渗透性的CXCR7调节剂的研究开发。

      此外，具有可测被动渗透性（P_app = 6.2 × 10⁻⁶ cm/s）的生物活性肽25（K_i = 9 nM，EC₅₀ = 15 nM）在大鼠中表现出可接受的口服生物利用度（F = 18%）。为了进一步提高其口服吸收，下一步就是在保持其CXCR7效力和被动渗透性特性的同时，改善其代谢稳定性。